牛病毒性腹泻病毒Core蛋白的原核表达及多克隆抗体制备 | |
张康2; 张璇1; 闫遵祥2; 王磊2; 张凯2; 张景艳2; 罗永江2; 仇正英2; 薛欢3; 李建喜2 | |
刊名 | 浙江农业学报 |
2019 | |
卷号 | 31期号:11页码:1819-1824 |
关键词 | 牛病毒性腹泻病毒 Core蛋白 表达 多克隆抗体 |
ISSN号 | 1004-1524 |
英文摘要 | 为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的Core蛋白及其多克隆抗体,根据Core蛋白的编码基因序列,设计合成一对特异性引物,利用RT-PCR扩增BVDV Core基因并定向插入Pet30a载体中,构建重组质粒Pet30a-Core,经酶切鉴定后转化大肠埃希菌TOP 10感受态细胞,筛选获得阳性重组菌,以IPTG进行诱导后成功表达出分子质量为20 ku的重组Core蛋白。将诱导表达的蛋白产物经融合蛋白的Ni柱亲和法进行纯化,利用纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,并利用间接ELISA法测出多克隆抗体效价达到1∶512 000。蛋白质印迹法(Western blot)和间接免疫荧光试验(IFA)证实,多克隆抗体可与细胞中的BVDV抗原发生反应,具有良好的免疫原性和特异性。本实验成功制备了BVDV重组Core蛋白的兔源多克隆抗体,为BVDV的检测及其Core蛋白功能研究奠定了基础。 |
WOS研究方向 | Agriculture |
语种 | 中文 |
CSCD记录号 | CSCD:6633167 |
内容类型 | 期刊论文 |
源URL | [http://ir.lut.edu.cn/handle/2XXMBERH/156421] |
专题 | 省部共建有色金属先进加工与再利用国家重点实验室 |
作者单位 | 1.兰州理工大学生命科学与工程学院, 兰州, 甘肃 730050, 中国; 2.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所, 农业农村部兽用药物创新重点实验室;;甘肃省新兽药工程重点实验室, 兰州, 甘肃 730050, 中国; 3.西安交通大学基础医学院, 西安, 陕西 710061, 中国 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 张康,张璇,闫遵祥,等. 牛病毒性腹泻病毒Core蛋白的原核表达及多克隆抗体制备[J]. 浙江农业学报,2019,31(11):1819-1824. |
APA | 张康.,张璇.,闫遵祥.,王磊.,张凯.,...&李建喜.(2019).牛病毒性腹泻病毒Core蛋白的原核表达及多克隆抗体制备.浙江农业学报,31(11),1819-1824. |
MLA | 张康,et al."牛病毒性腹泻病毒Core蛋白的原核表达及多克隆抗体制备".浙江农业学报 31.11(2019):1819-1824. |
个性服务 |
查看访问统计 |
相关权益政策 |
暂无数据 |
收藏/分享 |
除非特别说明,本系统中所有内容都受版权保护,并保留所有权利。
修改评论