| 题名 | 马铃薯StSUT基因的表达分析及StSUT2基因表达载体的构建 |
| 作者 | 田泽 |
| 答辩日期 | 2019 |
| 导师 | 巩慧玲 |
| 关键词 | 马铃薯 StSUT2 表达分析 载体构建 |
| 学位名称 | 硕士 |
| 英文摘要 | 马铃薯(Solanum tuberosum L.)是世界上继小麦、水稻、玉米之后的第四大粮食作物,栽培范围遍布全球160多个国家。植物蔗糖转运蛋白(sucrose transporter,SUT)主要负责蔗糖从“源”器官到“库”器官的长距离运输,影响植物的生长和发育,决定作物的产量和品质。在马铃薯中共分离到三种SUT基因,分别为StSUT1、StSUT2和StSUT4,近期研究表明StSUT1和StSUT4影响马铃薯植株的生长、块茎的产量和光周期调控基因的表达,而StSUT2的生理功能仍不清楚,对其表达模式和亚细胞定位等方面还缺乏深入的研究。本研究分析了三种StSUT在马铃薯不同组织器官中的表达模式,并构建了SUT2植物超表达载体和原核表达载体,主要得到以下实验结果:(1)采用qPCR技术,对马铃薯“Favorita”和“Shepody”两个品种的SUT基因在不同组织器官、不同光照时间中的相对表达量进行了分析,结果表明:两个马铃薯品种的表达模式类似,StSUT1基因主要在成熟的叶片和老叶中表达,并且受光照时间的影响。StSUT4基因主要在花和老叶中表达,在茎、根以及匍匐茎中也有较高的表达,也受光照时间的影响。StSUT2基因主要在花和老叶中表达,在成熟叶片、茎、根以及匍匐茎中也有较高的表达,但是受光照时间影响不大。各个组织器官中StSUT基因的相对表达量在4 h时几乎均高于16 h时,但也有些例外,这些现象推测可能与马铃薯的块茎形成有关。(2)从马铃薯“Atlantic”品种的组培苗叶片中提取总RNA,以其反转录获得的cDNA为模板,PCR扩增得到了StSUT2基因,并通过TOPO定向克隆构建了入门载体pENTR-StSUT2,经PCR和序列分析鉴定,该片段大小为1818 bp,编码605个氨基酸残基,通过序列分析与文献报道的碱基序列有98%的同源性;通过Gateway技术中的LR重组反应,构建了pGWB2-StSUT2植物超表达载体,并转入农杆菌GV3101中。(3)以马铃薯”Atlantic”品种的cDNA为模板,克隆了StSUT2基因,与pET-21d载体连接,转化BL21(DE3)大肠杆菌,得到了pET-StSUT2原核表达载体。以上研究对后续探究马铃薯StSUT2的功能奠定了基础。 |
| 语种 | 中文 |
| 页码 | 68 |
| URL标识 | 查看原文 |
| 内容类型 | 学位论文 |
| 源URL | [http://ir.lut.edu.cn/handle/2XXMBERH/95112]  |
| 专题 | 兰州理工大学 |
| 作者单位 | 兰州理工大学 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 田泽. 马铃薯StSUT基因的表达分析及StSUT2基因表达载体的构建[D]. 2019. |
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