细胞内的能量代谢物质（如三磷酸腺苷ATP 、果糖 1 6 二磷酸等）是维系细胞正常功能的能量来源，与细胞内信号传导、疾病的发生密切相关。因此，对细胞内能量代谢物质的准确快速测定对于细胞正常生理功能的认识以及疾病发生机制研究具有重要意义。但是，能量代谢物质在细胞内水平较低且容易降解或转化，需要发展灵敏的、准确的分析技术。针对上述需求，本文发展了用于三磷酸腺苷和果糖 1 6 二磷酸及其代谢产物分析的高效液相色谱法，并研究了醌类环境污染物暴露对细胞内 A TP 的影响。
    首先,概述了三磷酸腺苷和果糖 1 6 二磷酸对细胞正常生理活动的作用，分别介绍了两类能量代谢物质的分析方法，提出 三磷酸腺苷和果糖 1 6 二磷酸及其代谢物分析存在的问题。
    进而,发展了三磷酸腺苷（ ATP ）及其代谢物二磷酸腺苷 ADP ）和一磷酸腺苷（ AMP ）的高相液相色谱分析方法，并测定了该类物质在在 MRC 5 细胞中的含量。实验发现，在等度洗脱条件下， ATP 、 ADP 和 AMP 在 20 min 内达到基线分离。在 0.1 100 μ M 浓度线性范围内获得 ATP 、 ADP 和 AMP 的工作曲线，相关性系数均大于 0.999 。用发展的方法测定了 MRC 5 细胞中的三种代谢物。为防止细胞处理方法带来的干扰，实验采用 80% 的冰甲醇法对细胞内的能量代谢物进行提取。另外，发现温度能够影响细胞中 ATP 、 ADP 和 AMP 的水平，降低温度亦使细胞内的 ATP 水平升高。
    接下来的实验部分研究了醌类污染物膀胱癌细胞 T24 引起的能量代谢物质水平变化。醌类化合物暴露 T24 细胞 12 h 后，获得 IC50 2 氯苯醌（ 2 CBQ74 μ M 2 ,5 二氯 1 4 苯醌 2,5 DCBQ 82 μM 2,6 二氯 1 4 苯醌（ 2,6 DCBQ122 μM 2,3,6 三氯 1 4 苯醌（ TCBQ 45 μM 。 考察了对 T24 细胞中 ATP 含量的影响。实验发现，暴露四种醌类化合物后， T24 细胞内的活性氧 ROS 含量增加， ATP 酶活性越低，导致更少的 ATP 在 T24 细胞内被分解，所以将积累更多的 ATP 。这项研究表明，这四种醌类化合物 有可能直接或者间接地 阻碍 T24细胞内能量分解的途径。
     最后,建立了一种高效液相色谱法用于细胞内的果糖 1 6 二磷酸的含量定量检测。利用该方法对人肾上皮细胞细胞系 293T 中的果糖 1 6 二磷酸的含量进行了定量分析。方法的线性范围为 0.1 50 μ M R 2 0.995 。检测限是 0.0 3 μM ，定量下限是 0.01 μ M 。本研究所建立的分析方法的检测限和定量下限都非常低， 灵敏度 很 高，能够满足细胞中该化合物测定的要求。                                                最后对全文进行了总结，并 对细胞内能量代谢物质的分析方法、与疾病的关系研究等方面做了研究展望。
     综上，本论文建立了两种高效液相色谱法用来定量测定细胞内的果糖1,6二磷酸和三磷酸腺苷及其代谢物。通过对分析实验条件的优化及其对建立的分析方法进行评价发现，本论文中建立的分析方法满足细胞中定量测定的要求，为这两种代谢物含量的测定提供了一种选择。