产乙醇大肠杆菌的构建及其活性检测方法的改进

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	产乙醇大肠杆菌的构建及其活性检测方法的改进
	姜进举 ; 张宏宇 ; 任宝永 ; 施斐 ; 崔玉琳 ; 秦松
刊名	中国生物工程杂志
	2011
卷号	31 期号:8 页码:31
关键词	生物乙醇丙酮酸脱羧酶乙醇脱氢酶乙醛指示平板运动发酵单胞菌蓝藻
其他题名	Construction of Alcohol-producing Escherichia coli strains and Improvement of Biological Activity Detection Method for the Engineered Strains
通讯作者	秦松 sqin@yic.ac.cn
产权排序	中国科学院烟台海岸带研究所;中国科学院研究生院;中国科学院海洋研究所;
中文摘要	adhB和pdc是运动发酵单胞菌产乙醇途径的关键基因,分别编码乙醇脱氢酶和丙酮酸脱羧酶,将添加有聚球藻PCC7942rbcLS基因RBS序列的adhB和pdc基因插入pUC18载体,经双重菌液PCR检验和酶切检验得到分别含有pUC-adhB、pUC-pdc和pUC-adhB-pdc载体的3个重组菌株。活性检测实验表明聚球藻PCC7942的rbcLS基因的RBS序列能有效介导运动发酵单胞菌的adhB和pdc基因在大肠杆菌中表达,摇瓶发酵实验表明重组大肠杆菌的产乙醇能力较出发菌株大幅提升。鉴于乙醛指示平板法存在着对希夫试剂的要求较高、易产生较强的背景色等缺点,对定性检测丙酮酸脱羧酶和乙醇脱氢酶表达菌株的方法做了改进,即:将菌液诱导表达,然后分别添加对应于两种酶的底物,让酶与底物反应0.5至1小时,之后再加希夫试剂进行显色反应,结果表明改进后的方法比乙醛指示平板法更加简便、快速、可靠。
学科主题	生物工程
收录类别	CSCD
资助信息	国家自然科学基金(40876082);; 山东省自然科学杰出青年基金(JQ200914)资助项目
语种	中文
CSCD记录号	CSCD:4335869
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.yic.ac.cn/handle/133337/5026]
专题	烟台海岸带研究所_海岸带生物学与生物资源利用所重点实验室
推荐引用方式 GB/T 7714	姜进举,张宏宇,任宝永,等. 产乙醇大肠杆菌的构建及其活性检测方法的改进[J]. 中国生物工程杂志,2011,31(8):31.
APA	姜进举,张宏宇,任宝永,施斐,崔玉琳,&秦松.(2011).产乙醇大肠杆菌的构建及其活性检测方法的改进.中国生物工程杂志,31(8),31.
MLA	姜进举,et al."产乙醇大肠杆菌的构建及其活性检测方法的改进".中国生物工程杂志 31.8(2011):31.