棉铃虫信息素结合蛋白2 cDNA的克隆、表达与组织特异性表达

	棉铃虫信息素结合蛋白2 cDNA的克隆、表达与组织特异性表达
	张帅 1; 张永军 1; 苏宏华 1; 高希武 2; 郭予元 1
刊名	中国农业科学
	2009
卷号	42 期号:7 页码:2359-2365
关键词	棉铃虫信息素结合蛋白原核表达纯化表达谱
ISSN号	0578-1752
其他题名	Cloning,Expression and Tissue-Specific Expression of cDNA Encoding Pheromone Binding Protein PBP2 in Helicoverpa armigera(H黱er)
英文摘要	[目的]克隆、分析和原核表达编码棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)信息素结合蛋白HarmPBP2的cDNA,并纯化得到HarmPBP2蛋白.[方法]以棉铃虫触角为材料,通过RT-PCR技术以获得编码中棉铃虫信息素结合蛋白HarmPBP2基因成熟蛋白开放阅读框序列,使用半定量RT-PCR对表达谱进行研究,并在使用pGEX-4T-1 表达载体在BL21(DE3)系统中进行原核表达,使用GSTrap FF预装柱进行纯化并切去标签.[结果]克隆了命名为HarmPBP2(GenBank登录号:EU647241)的棉铃虫信息素结合蛋白基因,该序列全长457 bp,编码149个氨基酸残基,前端是一段25个氨基酸长的信号肤,推测蛋白具有昆虫信息素结合蛋白典型的6个保守的半胱氨酸残基的特征.棉铃虫HarmPBP2在雌雄成虫的触角、足和翅中都有表达,另外在雌虫下颚须也有表达.雌雄组织表达量顺序相同,触角中表达量最高,翅中次之,足中最少.雌虫组织中表达量高于雄虫.构建的原核表达载体pGEX/HarmPBP2,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功地表达出一个分子量约为40 kD的融合蛋白,经亲和层析纯化与酶切得到去标签的HarmPBP2蛋白.[结论]克隆、分析和表达了棉铃虫信息素结合蛋白HarmPBP2的cDNA序列,并对其进行纯化,为进一步研究其分子结构和功能奠定了基础,同时对其表达谱进行了研究.
学科主题	植物保护
语种	中文
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.nais.net.cn/handle/2HMLN22E/137013]
专题	植物保护研究所_农业昆虫研究室
作者单位	1.中国农业科学研究院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京, 100193; 2.中国农业大学农学与生物技术学院, 北京, 100193
推荐引用方式 GB/T 7714	张帅,张永军,苏宏华,等. 棉铃虫信息素结合蛋白2 cDNA的克隆、表达与组织特异性表达[J]. 中国农业科学,2009,42(7):2359-2365.
APA	张帅,张永军,苏宏华,高希武,&郭予元.(2009).棉铃虫信息素结合蛋白2 cDNA的克隆、表达与组织特异性表达.中国农业科学,42(7),2359-2365.
MLA	张帅,et al."棉铃虫信息素结合蛋白2 cDNA的克隆、表达与组织特异性表达".中国农业科学 42.7(2009):2359-2365.