麦长管蚜嗅觉相关蛋白Gqα基因的克隆及真核表达

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	麦长管蚜嗅觉相关蛋白Gqα基因的克隆及真核表达
	范佳; 陈巨莲; 程登发; 孙京瑞
刊名	农业生物技术学报
	2009
卷号	17 期号:1 页码:78-83
关键词	麦长管蚜嗅觉相关蛋白 G蛋白α亚基q类蛋白(Gqα) 基因克隆杆状病毒表达系统
ISSN号	1006-1304
其他题名	Cloning and Expression of Gene Encoding Gqα-protein in the England Grain Aphid (Sitobion avenae)
英文摘要	根据已报道无脊椎动物嗅觉相关蛋白Gqoα的氨基酸序列保守区设计简并引物,以麦长管蚜(Sitobion avenae)有翅成蚜cDNA为模板,结合RT-PCR及RACE技术扩增编码麦长管蚜Gqα蛋白的cDNA序列,其cDNA序列开放阅读框长为1 062 bp,编码352个氨基酸,预测蛋白分子量为40.8 kD,与GenBank多个物种Gqα cDNA序列及氨基酸序列均有很高相似性(≥82.17%)(GenBank登录号为EF638906),并具有Gα亚基q类蛋白的典型特征.利用TOPO及Gateway技术,通过体外重组反应,构建苜蓿丫纹夜蛾核型多角体杆状病毒(Autographa californica nuclear polyhedrosis virus,AcMNPV)重组病毒.将N端融合了V5-His6标记的V5-His6Gqot序列整合到AcMNPV病毒基因组DNA中,得到具有独立转染活性的重组杆状病毒.转染粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)离体细胞系Tn-5B1-4(Tn细胞),进行Gqα蛋白的真核表达.SDS-PAGE检测到预期分子量约42kD的蛋白带,Westem blot检测到表达产物.表明含有6个组氨酸标签及V5抗体结合位点的Gqα融合蛋白V5-His6Gqα在昆虫离体细胞系中成功地表达.
学科主题	农业基础科学
语种	中文
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.nais.net.cn/handle/2HMLN22E/136784]
专题	植物保护研究所_职能部门
作者单位	中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京, 100193
推荐引用方式 GB/T 7714	范佳,陈巨莲,程登发,等. 麦长管蚜嗅觉相关蛋白Gqα基因的克隆及真核表达[J]. 农业生物技术学报,2009,17(1):78-83.
APA	范佳,陈巨莲,程登发,&孙京瑞.(2009).麦长管蚜嗅觉相关蛋白Gqα基因的克隆及真核表达.农业生物技术学报,17(1),78-83.
MLA	范佳,et al."麦长管蚜嗅觉相关蛋白Gqα基因的克隆及真核表达".农业生物技术学报 17.1(2009):78-83.