绿色荧光蛋白基因标记野生型生防枯草芽孢杆菌的研究

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	绿色荧光蛋白基因标记野生型生防枯草芽孢杆菌的研究
	姚震声 1; 陈中义 1; 陈志谊 2; 郑小波 3; 张杰 1; 黄大昉 1
刊名	生物工程学报
	2003
卷号	19 期号:5 页码:551-555
关键词	绿色荧光蛋白基因重迭PCR 枯草芽孢杆菌生物防治基因工程
ISSN号	1000-3061
其他题名	Genetically Marking of Natural Biocontrol Bacterium Bacillus subtilis Strains with Green Fluorescet Protein Gene
英文摘要	根据绿色荧光蛋白基因和枯草芽孢杆菌木糖诱导型启动子PxylR序列，分别设计两对特异引物primers PxyF/R和primers gfpF/R，扩增得到了完整的启动子PxylR和gfp基因序列。进一步以上述产物混合物为模板，以primer PxyF/ primer gfpR做引物进行重迭PCR，获得了PxylR-gfp重组翻译融合表达盒。经Sph I和Kpn I完全酶切后，将PxylR-gfp表达盒分别插入大肠杆菌-苏云金芽孢杆菌穿梭载体pHT35和大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pRP22。相应的重组表达质粒pGFP315和pGFP22转化枯草芽孢杆菌感受态细胞。前者在标准菌株168中得到良好发光表型，后者则在标准菌株168和野生目标菌株B916中均得到良好的发光表型。室内平板抑菌实验结果显示B916生防效果与发菌株没有明显差异，遗传稳定性研究表明连续稀释培养约175代后，工程菌株稳定性为94%，质粒丢失频率低于3.5*10~(-4)/代。
学科主题	分子生物学
语种	中文
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.nais.net.cn/handle/2HMLN22E/136672]
专题	植物保护研究所
作者单位	1.中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京, 100094; 2.江苏省农业科学院植物保护研究所, 南京, 210014; 3.南京农业大学植物保护学系, 南京, 210095
推荐引用方式 GB/T 7714	姚震声,陈中义,陈志谊,等. 绿色荧光蛋白基因标记野生型生防枯草芽孢杆菌的研究[J]. 生物工程学报,2003,19(5):551-555.
APA	姚震声,陈中义,陈志谊,郑小波,张杰,&黄大昉.(2003).绿色荧光蛋白基因标记野生型生防枯草芽孢杆菌的研究.生物工程学报,19(5),551-555.
MLA	姚震声,et al."绿色荧光蛋白基因标记野生型生防枯草芽孢杆菌的研究".生物工程学报 19.5(2003):551-555.