小麦亚硝酸还原酶基因及调控序列克隆、定位和表达分析 | |
佘茂云1; 陈朵朵2; 冯晨3; 杜丽璞1; 叶兴国1 | |
刊名 | 作物学报 |
2011 | |
卷号 | 37期号:1页码:28-39 |
关键词 | 小麦 亚硝酸还原酶 表达分析 启动子 染色体定位 |
ISSN号 | 0496-3490 |
其他题名 | Isolation, Chromosome Assignment, and Expression Assay of Nitrite Reductase Gene and Regulatory Sequence in Wheat |
英文摘要 | 利用in silico及反向PcR技术, 从小麦中克隆了亚硝酸还原酶编码基因及其调控序列, 进一步利用原核诱导表达、半定量RT-PCR、AS--PCR及生物信息学手段对克隆的新基因进行鉴定及染色体定位分析.开放阅读框预测结合测序结果表明, 该基因gDNA长2 881 bp, 包含4个外显子和3个内含子, cDNA长1 830 bp, GenBank登录号分别为FJ555239和FJ527909, 预测编码产物大小约为65.7 kD, 与NCBl已公布的亚硝酸还原酶基因编码产物同源性达 60%以上, 其中与其他单子叶谷类作物同源性达80%以上.IPCR技术延伸该基因5端侧翼序列至一2 924 bp(以ATG起始计算), 经l inln01 L~(-1) IPTG诱导后可表达大小约为70 kD的蛋白(含约3.8 kD的组氨酸标签).RT-PCR结果显示, 30 mm01 L~(-1)KN0_3, 处理小麦幼苗1 h, 亚硝酸还原酶基因表达量最高.酶活性测定表明, 随着KNO_3处理时间延长亚硝酸还原酶活性增强.AS-PCR检测发现, 该基因在普通小麦6A及68染色体上至少各存在1个拷贝 |
学科主题 | 植物学 |
语种 | 中文 |
内容类型 | 期刊论文 |
源URL | [http://ir.nais.net.cn/handle/2HMLN22E/129831] |
专题 | 作物科学研究所_分子生物学系 |
作者单位 | 1.中国农业科学院作物科学研究所, 国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程;;农业部作物遗传育种重点开放实验室, 北京, 100081; 2.武汉大学生命科学学院, 湖北, 武汉, 430072; 3.北京城市学院, 北京, 100083 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 佘茂云,陈朵朵,冯晨,等. 小麦亚硝酸还原酶基因及调控序列克隆、定位和表达分析[J]. 作物学报,2011,37(1):28-39. |
APA | 佘茂云,陈朵朵,冯晨,杜丽璞,&叶兴国.(2011).小麦亚硝酸还原酶基因及调控序列克隆、定位和表达分析.作物学报,37(1),28-39. |
MLA | 佘茂云,et al."小麦亚硝酸还原酶基因及调控序列克隆、定位和表达分析".作物学报 37.1(2011):28-39. |
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