基因枪法介导转人工合成Rs-AFP2基因小麦的获得和检测 | |
廖勇1; 张增艳1; 徐惠君1; 杜丽璞1; 姚乌兰1; 辛志勇1; 任正隆2 | |
刊名 | 麦类作物学报 |
2006 | |
卷号 | 26期号:4页码:15-19 |
关键词 | 萝卜抗菌肽Rs-AFP2 小麦 转基因 载体构建 |
ISSN号 | 1009-1041 |
其他题名 | Transferring of An Antifungal Protein Gene(Rs-AFP2) of Radish into Wheat Mediated with Biolistic Particle |
英文摘要 | 萝卜(Raphanus sativus)抗菌肽Rs—AFP2在体外强烈抑制小麦赤霉病菌(Fusarium graminenrum)、黄色镰孢菌(Fusarium culmorum)、烟草赤星病(Alternaria longipes)的菌丝生长。为了研究Rs-AFP2在小麦抗病育种上的应用潜力,人工合成了Rs-AFP2基因。通过基因重组技术(包括限制性内切酶酶切和连接),将人工合成的R以FP2基因替代单子叶高效组成型表达栽体pAHC25中的GUS基因,构建了R£AFP2基因的单子叶高效表达栽体pUAFP2。该栽体除携带受Ubiquitin启动子控制的Rs-AFP2基因表达盒外,还具有1个受Ubiqutin启动子控制的Bar基因表达盒,后者可为后续利用除草剂Bialaphos筛选转化再生植株提供抗性;采用基因枪法轰击小麦品种扬麦12、济麦19、晋麦47和豫麦34幼胚共4042个,经过2~3次Bialaphos筛选,最终获得扬麦12再生植株316株;利用高效表达栽体pUAFP2的Bar和Rs-AFP2基因的特异引物对上述成活的转化植株进行PCR检测,获得Bar和Rs-AFP2基因均为阳性的植株58株,转化率为1.43%。 |
学科主题 | 农学(农艺学) ; 农作物 |
语种 | 中文 |
内容类型 | 期刊论文 |
源URL | [http://111.203.20.206/handle/2HMLN22E/447] |
专题 | 作物科学研究所_分子生物学系 |
作者单位 | 1.中国农业科学院作物科学研究所, 农业部作物遗传育种重点开放实验室, 北京, 100081 2.四川农业大学农学院, 四川, 雅安, 625000 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 廖勇,张增艳,徐惠君,等. 基因枪法介导转人工合成Rs-AFP2基因小麦的获得和检测[J]. 麦类作物学报,2006,26(4):15-19. |
APA | 廖勇.,张增艳.,徐惠君.,杜丽璞.,姚乌兰.,...&任正隆.(2006).基因枪法介导转人工合成Rs-AFP2基因小麦的获得和检测.麦类作物学报,26(4),15-19. |
MLA | 廖勇,et al."基因枪法介导转人工合成Rs-AFP2基因小麦的获得和检测".麦类作物学报 26.4(2006):15-19. |
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